方法名稱： 左金丸—吳茱萸次堿的測定—高效液相色譜法

應(yīng)用范圍： 本方法采用高效液相色譜法測定左金丸中吳茱萸次堿的含量。

本方法適用于中成藥制劑左金丸。

方法原理： 供試品于錐形瓶中，加乙醇溶解，超聲提取。提取液過濾后進(jìn)入高效液相色譜儀進(jìn)行色譜分離，用紫外吸收檢測器，于波長345nm處檢測吳茱萸次堿的吸收值，計(jì)算出其含量。

試劑： 1. 甲醇

2. 乙醇

3. 乙腈

儀器設(shè)備： 1 儀器

1.1 高效液相色譜儀

1.2 色譜柱

Intersil C18色譜分析柱（4.6mm ID×250mm, 粒徑5um），理論板數(shù)為2100。

1.3 紫外吸收檢測器

2 色譜條件

2.1 流動(dòng)相：乙腈 10%乙腈=50 50

2.2 檢測波長：345nm

試樣制備： 1.對(duì)照品溶液的制備

對(duì)照品貯備液為10ug/ml乙醇溶液。精密量取吳茱萸次堿對(duì)照品貯備液3ml，置25ml 量瓶中，加乙醇稀釋至刻度，搖勻，即得（每ml含吳茱萸次堿12ug）。

2. 供試品溶液的制備

取左金丸12g，研為細(xì)粉。取左金丸細(xì)粉0.7g，精密稱定，置100ml具塞錐形瓶中，加入精密量取的乙醇25ml，精密稱定，水浴加熱提取60min，放冷至室溫，再精密稱定，補(bǔ)足減失的溶劑，混勻，用0.45um濾膜濾過，即得。

注：“精密稱取”系指稱取重量應(yīng)準(zhǔn)確至所取重量的千分之一。“精密量取”系指量取體積的準(zhǔn)確度應(yīng)符合國家標(biāo)準(zhǔn)中對(duì)該體積移液管的精度要求。

操作步驟： 1. 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制

精密量取吳茱萸次堿對(duì)照品貯備液適量，用乙醇稀釋成系列濃度(n=5)，分別取20ul 注入液相色譜儀，記錄色譜峰面積，以峰面積均值X (n=3)對(duì)進(jìn)樣濃度Y (ug/ml) 線性回歸，得回歸方程。

2. 供試品的測定

分別精密吸取上述供試品溶液20μL注入高效液相色譜儀，用紫外吸收檢測器，于波長345nm處測定吳茱萸次堿的吸收值，計(jì)算出其含量。

參考文獻(xiàn)： 潘敏翔，劉昌葉，常華，趙淼，姜韌。HPLC測定左金丸中吳茱萸次堿含量，藥物實(shí)踐雜志，2002，20(4)：236-237．