喹諾酮類(lèi)和其他抗菌藥的作用點(diǎn)不同，它們以細(xì)菌的脫氧核糖核酸（DNA）為靶。細(xì)菌的雙股DNA扭曲成為袢狀或螺旋狀（稱(chēng)為超螺旋），使DNA形成超螺旋的酶稱(chēng)為DNA回旋酶，喹諾酮類(lèi)妨礙此種酶，進(jìn)一步造成細(xì)菌DNA的不可逆損害，而使細(xì)菌細(xì)胞不再分裂。它們對(duì)細(xì)菌顯示選擇性毒性。當(dāng)前，一些細(xì)菌對(duì)許多抗生素的耐藥性可因質(zhì)粒傳導(dǎo)而廣泛傳布。本類(lèi)藥物則不受質(zhì)粒傳導(dǎo)耐藥性的影響，因此，本類(lèi)藥物與許多抗菌藥物間無(wú)交叉耐藥性。

喹諾酮類(lèi)是主要作用于革蘭陰性菌的抗菌藥物，對(duì)革蘭陽(yáng)性菌的作用較弱（某些品種對(duì)金黃色葡萄球菌有較好的抗菌作用）。