天然青霉素與半合成青霉素生產(chǎn)方法完全不同。

天然青霉素

青霉素G生產(chǎn)可分為菌種發(fā)酵和提取精制兩個(gè)步驟。①菌種發(fā)酵：將產(chǎn)黃青霉菌接種到固體培養(yǎng)基上，在25℃下培養(yǎng)7～10天，即可得青霉菌孢子培養(yǎng)物。用無(wú)菌水將孢子制成懸浮液接種到種子罐內(nèi)已滅菌的培養(yǎng)基中，通入無(wú)菌空氣、攪拌，在27℃下培養(yǎng)24～28h，然后將種子培養(yǎng)液接種到發(fā)酵罐已滅菌的含有苯乙酸前體的培養(yǎng)基中，通入無(wú)菌空氣，攪拌，在27℃下培養(yǎng)7天。在發(fā)酵過(guò)程中需補(bǔ)入苯乙酸前體及適量的培養(yǎng)基。②提取精制：將青霉素發(fā)酵液冷卻，過(guò)濾。濾液在pH2～2.5的條件下，于萃取機(jī)內(nèi)用醋酸丁酯進(jìn)行多級(jí)逆流萃取，得到丁酯萃取液，轉(zhuǎn)入pH7.0～7.2的緩沖液中，然后再轉(zhuǎn)入丁酯中，將此丁酯萃取液經(jīng)活性炭脫色，加入成鹽劑，經(jīng)共沸蒸餾即可得青霉素G鉀鹽。青霉素G鈉鹽是將青霉素G鉀鹽通過(guò)離子交換樹(shù)脂（鈉型）而制得。

半合成青霉素

以6APA為中間體與多種化學(xué)合成有機(jī)酸進(jìn)行?；磻?yīng)，可制得各種類(lèi)型的半合成青霉素。

6APA是利用微生物產(chǎn)生的青霉素?；噶呀馇嗝顾谿或V而得到。酶反應(yīng)一般在40～50℃、pH8～10的條件下進(jìn)行；近年來(lái)，酶固相化技術(shù)已應(yīng)用于6APA生產(chǎn)，簡(jiǎn)化了裂解工藝過(guò)程。6APA也可從青霉素G用化學(xué)法來(lái)裂解制得，但成本較高。側(cè)鏈的引入系將相應(yīng)的有機(jī)酸先用氯化劑制成酰氯，然后根據(jù)酰氯的穩(wěn)定性在水或有機(jī)溶劑中，以無(wú)機(jī)或有機(jī)堿為縮合劑，與6APA進(jìn)行?；磻?yīng)?？s合反應(yīng)也可以在裂解液中直接進(jìn)行而不需分離出6APA。

青霉素濃縮法

利用青霉素特異性地殺死野生型細(xì)胞、保留營(yíng)養(yǎng)缺陷型細(xì)胞的方法。青霉素能抑制細(xì)菌細(xì)胞壁的合成，所以只能殺死生長(zhǎng)繁殖中的細(xì)菌，而不能殺死停止分裂的細(xì)菌。在只能使野生型生長(zhǎng)而不能使突變型生長(zhǎng)的選擇性液體培養(yǎng)基中，野生型被青霉素殺死，而突變型則不被殺死，從而淘汰野生型，使突變型得以濃縮?？蛇m用于細(xì)菌和放線菌，是營(yíng)養(yǎng)缺陷型突變體篩選的常用方法之一。