方法名稱(chēng)： 雙黃連顆粒-黃芩苷測(cè)定-連翹苷的測(cè)定-高效液相色譜法

應(yīng)用范圍： 本方法采用高效液相色譜法測(cè)定雙黃連顆粒中黃芩苷和連翹苷的含量。

本方法適用于中成藥雙黃連顆粒。

方法原理： 本方法采用高效液相色譜法測(cè)定雙黃連顆粒中黃芩苷和連翹苷的含量。

本方法適用于中成藥雙黃連顆粒。

試劑： 1. 甲醇（色譜純）

2. 乙腈（色譜純）

3. 磷酸

4. 黃芩苷對(duì)照品（中國(guó)藥品生物制品檢定所）

5. 連翹苷對(duì)照品（中國(guó)藥品生物制品檢定所）

儀器設(shè)備： 1 儀器

1.1 高效液相色譜儀

1.2 色譜柱

Create C18柱（4.6mm×250mm，5μm）

1.3二極管陣列檢測(cè)器

1.4 全自動(dòng)進(jìn)樣器

1.5 色譜工作站

1.6超聲發(fā)生器

2 色譜條件

2.1流動(dòng)相：乙腈+水+磷酸=100+300+1

2.2流速：1.0ml/min

2.3檢測(cè)波長(zhǎng)：230nm

2.4柱溫：28℃

試樣制備： 1. 標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備

精密稱(chēng)取黃芩苷、連翹苷對(duì)照品置于同一量瓶中，用甲醇配成0.01088mg/mL（黃芩苷）和0.0352mg/mL（連翹苷）的混合對(duì)照品溶液。

2. 供試品溶液的制備

取雙黃連顆粒約1g研細(xì)，取0.1g精密稱(chēng)定，置50mL量瓶中，加甲醇至刻度，超聲20min，放冷，定容，搖勻，用一次性針頭過(guò)濾器過(guò)濾，即得供試品溶液。

操作步驟： 1. 標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備

取混合對(duì)照品溶液，進(jìn)樣1、3、5、7、9、11mL，以進(jìn)樣量（mg）為橫坐標(biāo)，峰面積為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線?；貧w方程為：黃芩苷Y=1511046X-81061，r=0.99995，線性范圍（0.1088-1.1968） mg。連翹苷Y=519354X-11525，r=0.99991，線性范圍（0.0352-0.3872） mg。

2. 供試品的測(cè)定

精密吸取供試品溶液5μL注入高效液相色譜儀測(cè)定峰面積，外標(biāo)法計(jì)算黃芩苷和連翹苷的含量。

注：“精密稱(chēng)取”系指稱(chēng)取重量應(yīng)準(zhǔn)確至所稱(chēng)取重量的千分之一。“精密量取”系指量取體積的準(zhǔn)確度應(yīng)符合國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)中對(duì)該體積移液管的精度要求。

參考文獻(xiàn)： 白奎福，王英，趙丹江，HPLC法共同測(cè)定雙黃連顆粒中黃芩苷和連翹苷含量，中醫(yī)藥學(xué)報(bào)，2004，32（2）：13～14