抗中性粒細(xì)胞胞漿抗體（ANCA）檢測(cè)及臨床意義是檢驗(yàn)技士考試復(fù)習(xí)需要了解的知識(shí)，醫(yī)學(xué)教育網(wǎng)搜索整理如下：

一、ANCA概念及分類

抗中性粒細(xì)胞胞漿抗體是一種以中性粒細(xì)胞和單核細(xì)胞胞漿成份為靶抗原的自身抗體，對(duì)系統(tǒng)性血管炎炎癥性腸病等多種疾病的診斷和鑒別診斷具有重要的意義，已成為自身免疫性疾病的一項(xiàng)非常重要的常規(guī)檢測(cè)項(xiàng)目。

目前，已經(jīng)有十余種中性粒細(xì)胞胞漿成分被證實(shí)為ANCA的靶抗原，蛋白酶3（PR3），髓過氧化物酶（MPO），人白細(xì)胞彈性蛋白酶（HEL），乳鐵蛋白（LF），組織蛋白酶G（CathG），殺菌/通透性增強(qiáng)蛋白（BPI），人溶酶體相關(guān)膜蛋白2（H-LAMP2），溶菌素（LYS），天青殺素，防御素，烯醇化酶，葡萄糖醛酸酶。

根據(jù)乙醇固定的中性粒細(xì)胞基質(zhì)片中，可以區(qū)分兩種不同的熒光模型：一種胞漿型（c-ANCA），是均勻分布在整個(gè)中性粒細(xì)胞胞漿中的顆粒型熒光，細(xì)胞核無熒光。在乙醇和甲醛固定的中性粒細(xì)胞片中，其熒光模型表現(xiàn)相同。其主要的靶抗原是蛋白酶3（PR3）。

另一種是核周型（p-ANCA），是圍繞中性粒細(xì)胞細(xì)胞核周圍的平滑帶狀熒光。由多種抗原引起，主要靶抗原是髓過氧化物酶（MPO），人白細(xì)胞彈性蛋白酶（HEL），乳鐵蛋白（LF），組織蛋白酶G（CathG），殺菌/通透性增強(qiáng)蛋白（BPI），人溶酶體相關(guān)膜蛋白2（H-LAMP2），溶菌素（LYS）等。不同抗體在乙醇和甲醛固定的中性粒細(xì)胞片中，其熒光模型表現(xiàn)有所不同?？筂PO抗體產(chǎn)生的p-ANCA因耐甲醛，其熒光模型與在乙醇固定的中性粒細(xì)胞中出現(xiàn)的c-ANCA類似故叫甲醛抗性的p-ANCA.而其他非MPO抗體不與甲醛固定的中性粒細(xì)胞反應(yīng)，無熒光表現(xiàn)，這種類型又稱為甲醛敏感的p-ANCA.故根據(jù)乙醇和甲醛固定的中性粒細(xì)胞片表現(xiàn)，可初步判定ANCA的靶抗原PR3，MPO，非MPO三類。

二、ANCA的檢測(cè)

間接熒光免疫方法是檢測(cè)ANCA的參考方法或者標(biāo)準(zhǔn)方法，至今也是最常用的經(jīng)典方法。IIF是區(qū)分c-ANCA和p-ANCA的基礎(chǔ)，有較高敏感性，可半定量，但I(xiàn)IF測(cè)定的是總ANCA，不能準(zhǔn)確區(qū)分靶抗原，需特異性的檢測(cè)方法作為補(bǔ)充。

由于多種免疫性疾病患者存在ANA，用IIF法檢測(cè)ANCA時(shí)，會(huì)產(chǎn)生干擾實(shí)驗(yàn)結(jié)果的判斷。為避免干擾現(xiàn)象，采用了四基質(zhì)聯(lián)合的檢測(cè)即：乙醇固定的粒細(xì)胞；甲醛固定的粒細(xì)胞；Hep-2（人喉癌細(xì)胞）細(xì)胞；猴肝細(xì)胞。基質(zhì)片各細(xì)胞分布及意義如表一所述。ANCA熒光模型及表現(xiàn)如表二所述。

三、注意事項(xiàng)

為提高對(duì)疾病診斷的特異性，檢測(cè)時(shí)應(yīng)注意以下問題1、檢測(cè)ANCA，一般建議同時(shí)做IIF初篩和確認(rèn)實(shí)驗(yàn)，以提高ANCA的臨床應(yīng)用價(jià)值，不做單獨(dú)初篩或單獨(dú)確認(rèn)實(shí)驗(yàn)，以免降低對(duì)疾病診斷的特異性。

2、不能僅檢測(cè)抗PR3和MPO兩種特異性抗體，而不檢測(cè)，這樣容易限制ANCA對(duì)疾病診斷的特異性。

3、用IIF檢測(cè)時(shí)，僅使用乙醇固定的粒細(xì)胞片，這樣不能嚴(yán)格排除ANA的干擾，容易出現(xiàn)假陽性。

四、臨床意義

（一）ANCA與原發(fā)性小血管炎韋格納肉芽腫（WG），顯微多動(dòng)脈炎（MPA），壞死性新月體性腎小球腎炎（NCGN）和變應(yīng)性肉芽腫性血管炎（CSS）等等原發(fā)性系統(tǒng)性小血管炎的發(fā)病與ANCA密切相關(guān)，臨床上已將上述疾病統(tǒng)稱為ANCA相關(guān)小血管炎。ANCA，特異性PR3抗體和抗MPO抗體的檢測(cè)已成為原發(fā)性小血管炎的敏感特異的血清學(xué)檢測(cè)項(xiàng)目。

1、抗PR3抗體特異性PR3抗體為WG的標(biāo)志性抗體，抗PR3抗體熒光模型以c-ANCA為主。但以c-ANCA診斷WG特異性為90%，而以抗PR3抗體的特異性可超過95%.抗PR3抗體在其他的原發(fā)性血管炎中業(yè)可以檢測(cè)出來，但陽性率較低。

抗PR3抗體敏感度與疾病的活動(dòng)性及病程有關(guān)，在疾病的早期癥狀不明顯時(shí)，就可出現(xiàn)陽性。因而抗PR3抗體常作為WG的早期診斷、療效判斷、復(fù)發(fā)估計(jì)的指標(biāo)，對(duì)臨床治療有重要的參考價(jià)值。

2、抗MPO抗體抗MPO抗體熒光模型以p-ANCA為主，主要與MPA、NCGN、CSS相關(guān)。還可見于其他疾病，如節(jié)結(jié)性多動(dòng)脈炎，抗腎小球基底膜腎病，WG，SLE，RA，藥物誘導(dǎo)的狼瘡，F(xiàn)elty綜合癥等?？贵w滴度與疾病活動(dòng)性相關(guān)，可用于早期診斷、療效判斷、復(fù)發(fā)估計(jì)的指標(biāo)，對(duì)臨床治療有重要的參考價(jià)值。

抗MPO抗體陽性高度提示壞死性血管炎或特發(fā)性NCGN，對(duì)診斷原發(fā)性小血管炎的特異性達(dá)到99%.因而每一個(gè)不明原因的血管炎或腎小球腎炎的患者，都應(yīng)該檢測(cè)ANCA.

（二）ANCA與藥物誘導(dǎo)性血管炎近年來不斷有藥物治療引起的ANCA陽性的病例報(bào)道，如丙基硫氧嘧啶，肼苯噠嗪，普魯卡因酰胺，青酶胺，美滿霉素，他巴唑/甲巰咪唑等。其中報(bào)道比較多的是長(zhǎng)期使用丙基硫氧嘧啶引起的ANCA，其特點(diǎn)是滴度高，抗體譜廣（抗原主要是MPO，也可同時(shí)伴有或單獨(dú)出現(xiàn)其他靶抗原，如PR3，LF，CathG，BPI，LYS等）。

藥物誘導(dǎo)性血管炎患者臨床表現(xiàn)與原發(fā)性血管炎類似，停止丙基硫氧嘧啶用藥后，臨床癥狀好轉(zhuǎn)，ANCA可轉(zhuǎn)陰。因此，長(zhǎng)期使用丙基硫氧嘧啶治療過程中，應(yīng)定期檢測(cè)ANCA，及早發(fā)現(xiàn)藥物誘導(dǎo)性血管炎。

（三）ANCA與其他疾病除原發(fā)性血管炎外，其他一些疾病中也可出現(xiàn)ANCA，主要為p-ANCA，其靶抗原并非PR，MPO，而是LF，CathG，BPI，LYS等1、慢性炎癥性腸病（CIBD）

CIBD是一種消化系統(tǒng)的自身免疫性疾病，包括潰瘍性結(jié)腸炎（UC），克羅恩病（CD）兩種。以往的CIBD診斷依賴X線檢查，內(nèi)窺鏡及組織學(xué)診斷，缺乏有效的試驗(yàn)室指標(biāo)。近年來研究發(fā)現(xiàn)UC病人血清中ANCA陽性率為60-80%，而CD患者的陽性率為10-20%，多為p-ANCA，相關(guān)靶抗原有BPI等。滴度與疾病的活動(dòng)度和病程無關(guān)。因?yàn)閜-ANCA在UC陽性率高，CD陽性率低，故可作為兩者的鑒別診斷及UC早期診斷指標(biāo)。

2、結(jié)締組織病在結(jié)締組織病中，ANCA陽性主要見于SLE和RA，其他結(jié)締組織病中少見。但文獻(xiàn)報(bào)道在SLE和RA陽性率差異特別大（16-69%），這可能與使用方法，抗原基質(zhì)片及工作人員水平有很大關(guān)系。

SLE中ANCA陽性可能與慢性炎癥反應(yīng)有關(guān)，如動(dòng)脈炎，漿膜炎和CRP增加等。有報(bào)道抗MPO抗體與RA的關(guān)節(jié)外損害及血管損害有關(guān)。

3、自身免疫性肝病在自身免疫性肝病中，也可檢測(cè)到p-ANCA.在原發(fā)性硬化性膽管炎（PSC）患者中，p-ANCA陽性率高達(dá)70-80%，是該病重要的血清學(xué)指標(biāo)。

4、其他疾病有文獻(xiàn)報(bào)道，HIV，阿米巴，細(xì)菌感染以及不明原因的肺部慢性炎癥及纖維化患者中有p-ANCA陽性。