醫(yī)學(xué)教育網(wǎng)小編搜索整理了初級(jí)藥師考試需要復(fù)習(xí)的知識(shí)點(diǎn)-細(xì)胞培養(yǎng)液的構(gòu)成，現(xiàn)分享給大家：

細(xì)胞培養(yǎng)液指細(xì)胞生長(zhǎng)的液體環(huán)境，一般指完全培養(yǎng)液，添加了血清、水解乳蛋白、各種添加劑等可以直接使用的培養(yǎng)液。

1.細(xì)胞培養(yǎng)基&血清模式

血清對(duì)于在傳統(tǒng)培養(yǎng)基配方中生長(zhǎng)和增殖的大多數(shù)細(xì)胞系來(lái)說(shuō)是需要的，因?yàn)榇蠖鄶?shù)單獨(dú)的培養(yǎng)基并不能提供細(xì)胞生長(zhǎng)所需要的全部營(yíng)養(yǎng)，如MEM培養(yǎng)基，較為常用的量為5%～10%的比例，而特殊的低血清培養(yǎng)基血清量可降至3%左右，細(xì)胞的形態(tài)和功能不受影響。

注：SLM120為清大天一公司低血清培養(yǎng)基，上圖為培養(yǎng)24小時(shí)細(xì)胞密度，下圖為48小時(shí)細(xì)胞密度。

血清可在培養(yǎng)基滅菌后加入，也可與培養(yǎng)基混合后一起過(guò)濾。血清的添加一方面補(bǔ)充了細(xì)胞生長(zhǎng)、增殖所需的一些因子（如生長(zhǎng)因子等），另一方面也增加了培養(yǎng)基的黏滯度，這樣可以降低細(xì)胞在懸浮培養(yǎng)中或被胰蛋白酶消化后的損傷。

但是血清的加入也帶來(lái)了很多問(wèn)題，血清都是批量生產(chǎn)，各批之間差異很大，血清含一些對(duì)細(xì)胞產(chǎn)生毒性的物質(zhì)，如多胺氧化酶、補(bǔ)體、抗體、細(xì)菌毒素等都會(huì)影響細(xì)胞生長(zhǎng)，甚至造成細(xì)胞死亡。血清的使用使得實(shí)驗(yàn)和生產(chǎn)的標(biāo)準(zhǔn)化困難，其中的蛋白質(zhì)使得某些轉(zhuǎn)基因蛋白生物藥品生產(chǎn)中分離純化工作很難完成。血清質(zhì)量問(wèn)題還會(huì)對(duì)接種病毒以及毒價(jià)產(chǎn)生影響，例產(chǎn)毒少，毒價(jià)低。

2.細(xì)胞培養(yǎng)基&乳歐液模式

化學(xué)合成培養(yǎng)基現(xiàn)雖已大規(guī)模使用，但在某些培養(yǎng)領(lǐng)域水解乳蛋白仍在使用，以補(bǔ)充培養(yǎng)液中缺乏的氨基酸、小肽物質(zhì)。較為常用的方式是用漢氏或歐式平衡鹽溶液溶解水解乳蛋白（一般為5‰濃度），即成乳漢（歐）液，再與化學(xué)合成培養(yǎng)基（一般為MEM）按比例混合使用（如1：1）。

水解乳蛋白為乳白蛋白經(jīng)蛋白酶和肽酶水解的產(chǎn)物，含有豐富的氨基酸。既可用于細(xì)菌微生物培養(yǎng)，又可用于動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)。細(xì)胞培養(yǎng)中一般為0.5%水解乳蛋白（經(jīng)平衡鹽溶解）與合成培養(yǎng)基（如MEM）按1：1混合使用。目前在生產(chǎn)中主要用于地鼠腎細(xì)胞等細(xì)胞的培養(yǎng)和維持。但是水解乳蛋白的使用也給生物制品的生產(chǎn)帶來(lái)一定的風(fēng)險(xiǎn)。首先由于水解乳蛋白來(lái)源于動(dòng)物，有可能攜帶傳染源，包括病毒和有毒物質(zhì)。任何一種傳染源都可能對(duì)正在生長(zhǎng)的細(xì)胞系或者制品帶來(lái)風(fēng)險(xiǎn)。其次水解乳蛋白及含有動(dòng)物組分培養(yǎng)基的使用，使生物制品下游處理變得復(fù)雜，這對(duì)于蛋白質(zhì)藥物顯得更加重要。因?yàn)橛脛?dòng)物細(xì)胞生產(chǎn)生物藥品，其面臨的最大困難就是如何去除內(nèi)源或同源蛋白。不確定的成分，例如動(dòng)物肽類物質(zhì)的引入，勢(shì)必會(huì)增加提取、分離、純化步驟，一方面使成本提高，另一方面也會(huì)影響生物制品的產(chǎn)量和質(zhì)量。

3.細(xì)胞培養(yǎng)基&各類添加劑（生長(zhǎng)因子等）模式

成分復(fù)雜的培養(yǎng)基還含有許多化合物，包括蛋白質(zhì)、多肽、核苷、檸檬酸循環(huán)的中間產(chǎn)物、丙酮酸及脂類等。已發(fā)現(xiàn)當(dāng)培養(yǎng)基中的血清濃度減少時(shí)，這些成分都是必需的。既使在使用血清的情況下，這些成分也可幫助細(xì)胞的克隆化培養(yǎng)及維持某些特殊細(xì)胞系的生長(zhǎng)。

激素和生長(zhǎng)因子在大多數(shù)常規(guī)培養(yǎng)基的配方中都沒(méi)有注明，但在無(wú)血清培養(yǎng)基中通常要加入它們，用其來(lái)代替血清中的激素（包括50ng/ml的生長(zhǎng)激素和1～10U/ml的胰島素），它們能增加多種不同類型細(xì)胞的貼瓶率；氫化可的松能提高膠質(zhì)細(xì)胞、成纖維細(xì)胞的克隆形成率。生長(zhǎng)因子包括FGF家族、EGF、PDGF、IGF-1和IGF-2及白介素等，生長(zhǎng)因子和細(xì)胞因子有著廣泛的特異性，一般與激素或其它物質(zhì)起相互協(xié)同或加成作用。

另一種常見(jiàn)的添加物就是血清替代物，目前已有許多可完全或部分替代傳統(tǒng)培養(yǎng)液中血清成分的商業(yè)產(chǎn)品，其穩(wěn)定性較好，但批次間仍有差別，產(chǎn)品的成分也不很確定。