摘 要:目的研究本室構建的可溶性PD-1(sPD-1)真核表達質粒pPD-1A的抑瘤機理。
方法 用轉染了pPD-1A的BHK細胞分泌產物去封閉樹突狀細胞上的PD-1配體(PD-L),并用MTT法檢測樹突狀細胞(DC)對小鼠脾細胞的增殖激活作用。BALB/c小鼠接種H22肝癌細胞后次日開始接受質粒pPD-1A的注射。用RT-PCR法分析小鼠脾細胞的細胞因子和共刺激分子的mRNA表達水平,用流式細胞術測定腫瘤內T淋巴細胞的數(shù)量。
結果 在淋巴細胞活化的早期sPD-1對IL-10-DC激活淋巴細胞的作用有一定的促進,但作用并不十分顯著(P>0.05)。注射了質粒pPD-1A的小鼠產生了較強的抗瘤免疫反應,H22肝癌細胞的生長明顯受到抑制(P<0.01)。脾臟淋巴細胞的4-1BB、B7.1、IFN-γ和TNF-α表達均上調,以IFN-γ的增加最明顯;OX40、IL-10表達下調。腫瘤內TIL數(shù)量明顯增多(75.86%)。
結論 sPD-1通過對PD-L的封閉,不僅增加了腫瘤內部CD3+T細胞的數(shù)量,而且可以調節(jié)細胞因子和共刺激分子的表達,從而促進抗瘤免疫。
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