碳源和氮源利用試驗是細(xì)菌對單一來源的碳源利用的鑒定試驗。在枸櫞酸鹽培養(yǎng)基中,細(xì)菌只有利用枸櫞酸鹽作為碳源,分解后生成碳酸鈉使培養(yǎng)基變堿性,pH指示劑溴麝香草酚藍(lán)由淡綠色變?yōu)樯钏{(lán)色。常用的試驗方法有枸櫞酸鹽利用試驗、丙二酸鹽利用試驗。
1.枸櫞酸鹽利用試驗
?。?)原理:某些細(xì)菌能以銨鹽為唯一氮源,并且利用枸櫞酸鹽作為唯一碳源,可在枸櫞酸鹽培養(yǎng)基上生長,分解枸櫞酸鹽,使培養(yǎng)基變堿性。
?。?)培養(yǎng)基:枸櫞酸鹽培養(yǎng)基。
?。?)方法:將被檢菌接種于枸櫞酸鹽培養(yǎng)基,于35℃培養(yǎng)1~4d,每日觀察結(jié)果。
?。?)結(jié)果:培養(yǎng)基中的溴麝香草酚蘭指示劑由淡綠色變?yōu)樯钏{(lán)色為陽性;不能利用枸櫞酸鹽作為碳源的細(xì)菌,在此培養(yǎng)基上不能生長,培養(yǎng)基則不變色,為陰性。
(5)應(yīng)用:用于腸桿菌科中菌屬間的鑒定。在腸桿菌科中埃希菌屬、志賀菌屬、愛德華菌屬和耶爾森菌屬均為陰性,沙門菌屬、克雷伯菌屬通常為陽性醫(yī)`學(xué)教育網(wǎng)搜集整理。
2.丙二酸鹽利用試驗
(1)原理:有的細(xì)菌可利用丙二酸鹽作為唯一碳源,將丙二酸鹽分解生成碳酸鈉,使培養(yǎng)基變堿。
?。?)培養(yǎng)基:丙二酸鹽培養(yǎng)基醫(yī)`學(xué)教育網(wǎng)搜集整理。
?。?)方法:將被檢菌接種于上述培養(yǎng)基,35℃培養(yǎng)24~48h后觀察結(jié)果。
?。?)結(jié)果:培養(yǎng)基由淡綠色變?yōu)樯钏{(lán)色為陽性,顏色無變化為陰性。
?。?)應(yīng)用:腸桿菌科中屬間及種的鑒別。克雷伯菌屬為陽性,枸櫞酸桿菌屬、腸桿菌屬和哈夫尼亞菌屬中有些菌種也呈陽性,其他菌屬均為陰性。