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    4種自體神經(jīng)移植方法修復(fù)周圍神經(jīng)缺損比較

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      周圍神經(jīng)缺損采用自體神經(jīng)移植均優(yōu)于其他移植體,在臨床上應(yīng)用最為廣泛,按移植神經(jīng)的血供情況可分為傳統(tǒng)的神經(jīng)移植(CNG,即不吻合血管的神經(jīng)移植)和吻合血管的神經(jīng)移植(VNG)。對(duì)于瘢痕組織床上的長(zhǎng)段神經(jīng)移植,動(dòng)物實(shí)驗(yàn)及臨床效果VNG明顯優(yōu)于CNG,而在正常組織床上行神經(jīng)移植時(shí),帶血管的游離神經(jīng)移植與傳統(tǒng)的神經(jīng)移植相比有無(wú)明顯優(yōu)勢(shì)尚有爭(zhēng)議。McCullough,Shibata等的結(jié)果均表明:在正常基礎(chǔ)上二種方法無(wú)明顯差別。但是,Restrep,Koshima等的結(jié)果卻表明:即使正?;睼NG仍優(yōu)于CNG.按移植段吻合時(shí)放置的位置,可分為順行放置吻合與逆行放置吻合,臨床上均有應(yīng)用,但二種方法對(duì)術(shù)后神經(jīng)恢復(fù)效果是否有差異未見(jiàn)報(bào)道,也未見(jiàn)實(shí)驗(yàn)研究報(bào)道。故本實(shí)驗(yàn)研究設(shè)計(jì):①順行放置吻合與逆行放置吻合的比較;②帶血管的游離神經(jīng)移植與不帶血管的游離神經(jīng)移植的比較,為臨床工作提供實(shí)驗(yàn)依據(jù),提高對(duì)神經(jīng)缺損的修復(fù)效果。

      1 材料與方法

      1.1 材料

      1.1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 選用4~5個(gè)月齡新西蘭兔78只,體重2~2.5kg,隨機(jī)分組,以6只作為正常對(duì)照組,其余72只等分為A、B、C、D四組,每組18只,每只白兔雙下肢均做同一種處理隨后組間進(jìn)行對(duì)比。A組:帶血管蒂的順行放置吻合;B組:帶血管蒂的逆行放置吻合;C組:不帶血管蒂的順行放置吻合;D組:不帶血管蒂的逆行放置吻合。

      1.1.2 實(shí)驗(yàn)設(shè)備?、匐p人雙目顯微鏡:XTS-6A,鎮(zhèn)江光學(xué)儀器廠生產(chǎn)。②顯微手術(shù)器械:寧波醫(yī)療器械廠生產(chǎn)。③常規(guī)手術(shù)器械。④日本OLYM-PUS光學(xué)顯微鏡。⑤日本NikonMicropphot-fax顯微照相機(jī)。⑥高精度電子天平。⑦石蠟切片機(jī):德國(guó)REICHERT-JUNG1165型回轉(zhuǎn)式切片機(jī)。⑧DISA-1500型肌電圖儀(Dantes,Denark)。⑨加拿大Matrox-Ip8偽彩色圖像分析系統(tǒng)。⑩日立H-300透射電鏡。

      1.2 手術(shù)方法 采用25%烏拉坦(4ml/kg)靜脈麻醉,手術(shù)區(qū)剪毛后常規(guī)消毒鋪單,做大腿后部正中切口,于股二頭肌和半腱肌、半膜肌的肌間隙分離顯露坐骨神經(jīng)。A組:避開(kāi)供養(yǎng)坐骨神經(jīng)的血管,在梨狀肌出口下緣1cm處切斷坐骨神經(jīng),在雙人雙目顯微鏡下用9-0無(wú)創(chuàng)縫合線原位施行神經(jīng)外膜縫合,接著在其遠(yuǎn)側(cè)距近側(cè)吻合口1cm處再切斷坐骨神經(jīng),亦縫合神經(jīng)外膜。B組:根據(jù)該段坐骨神經(jīng)滋養(yǎng)血管的情況,游離出一段包含滋養(yǎng)血管在內(nèi)的組織蒂,切除1cm坐骨神經(jīng)作為移植段,將移植段神經(jīng)逆行放置,縫合神經(jīng)外膜。C組:將移植段坐骨神經(jīng)與周圍組織完全游離順行放置,縫合神經(jīng)外膜。D組:將移植段坐骨神經(jīng)與周圍組織完全游離,逆行放置,縫合神經(jīng)外膜。逐層縫合深筋膜及皮膚,無(wú)菌紗布包扎,石膏外固定。放回籠中喂養(yǎng),定期取材。

      1.3 觀察指標(biāo)

      1.3.1 顯微解剖觀察 于術(shù)后4,醫(yī)|學(xué)教育網(wǎng)搜集整理8,12周在手術(shù)顯微鏡下觀察移植神經(jīng)外觀,吻合口粘連程度,有無(wú)神經(jīng)瘤及瘢痕形成,神經(jīng)遠(yuǎn)端有無(wú)變性及鉗夾神經(jīng)干后肢體的反應(yīng)情況。

      1.3.2 脛前肌稱重 完整切除雙側(cè)脛前肌,高精度天平稱重。

      1.3.3 組織學(xué)觀察 對(duì)神經(jīng)進(jìn)行取材,在近端、遠(yuǎn)端吻合口以遠(yuǎn)3mm,分別切取坐骨神經(jīng),做HE染色及鋨酸髓鞘染色,光鏡下觀察,并進(jìn)行軸突圖像分析,每張切片拍4張不同視野、放大40倍的彩照,置于加拿大MATROX-Ip8偽彩色圖像分析系統(tǒng)下進(jìn)行分析。計(jì)算神經(jīng)移植段及神經(jīng)遠(yuǎn)端橫截面軸突的數(shù)目及再生軸突的恢復(fù)率,恢復(fù)率計(jì)算方法是以對(duì)照組正常神經(jīng)橫切面軸突數(shù)為基數(shù),與各時(shí)間組再生神經(jīng)遠(yuǎn)端橫斷面軸突數(shù)目比較,得出各自的再生軸突恢復(fù)率,并對(duì)各組結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。

      1.3.4 電生理檢查 術(shù)后12周測(cè)定神經(jīng)傳導(dǎo)速度、誘發(fā)電位波幅、潛伏期,使用DISA-1500型肌電誘發(fā)儀(DANTES,DENMARK),進(jìn)行雙側(cè)動(dòng)作電位(CMAP)檢查,將刺激電極插到神經(jīng)移植段以上,同心針記錄電極插入脛前肌,刺激電極距離記錄電極60.0mm,將地電極插入二者之間的肌肉中,給予電刺激,頻率1Hz,時(shí)程0.1ms.當(dāng)CMAP圖形穩(wěn)定,偽跡和動(dòng)作電位起點(diǎn)清楚后,測(cè)量記錄潛伏期(LAT)、波幅(AMP)及神經(jīng)傳導(dǎo)速度(CV)。打印圖形及有關(guān)數(shù)據(jù)。

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