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    分光光度使用方法經驗點滴

    2009-03-10 14:49 醫(yī)學教育網
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      1.堅持標準溶液現用現配,不使用過期標準液。使用儀器之前,一般要校正儀器,看看空白時透光率是否是100%。

      2.比色皿應該保持清潔,干燥。如有污物,可用稀鹽酸清洗后,再用1:1的酒精與乙醚清洗涼干。禁止用硬物碰或擦透明表面?;蛘呓ㄗh使用10%的鹽酸溶液浸泡,然后用無水乙醇沖洗2~3次。比色皿具有方向性,使用時要注意,仔細觀察比色皿上方應該有一個箭頭標志的,代表入射光方向。注入和倒出溶液時,應該選擇非透光面。最好使用配對的比色皿。

      3.防止儀器振動,影響光學系統(tǒng)。

      4.在開機狀態(tài),不測量時,應該打開樣品池門,否則,影響光電傳感器壽命。

      5.樣品集中測量,避免開機次數,可延長光源壽命。

      6.儀器工作穩(wěn)定性差,漂移大時,應該考慮更換光源或光電元件。

      7. 一般分光儀主要有光源部分、光路部分、檢測器三的部分,光路有的情況是穩(wěn)壓電源問題,鎢燈問題及鎢燈位置與光路不一致等問題。光路部分主要有比色皿不干凈,燈光與比色皿位置不合適(在正常情況下,比色皿位置放一張白紙,可以清楚看到光斑形狀呈顯矩形,屬于正常情況。對于檢測器大多數是正常的,但是光敏管或者光電管有時侯也會出現問題。 醫(yī).學教育網搜集整理

      8.若峰出現很多“毛刺”,可能是掃描速度過快,濃度過高或者狹縫過??;

      9. 紫外分光光度計用來測紫外光時,石英皿用來調零時不穩(wěn)定,是由那些原因?

      首先確定是否用成玻璃比色皿,判斷方法在紫外區(qū)任一波長下用空氣調零測比色皿的吸光度如果超過1ABS則比色皿用錯.再次用空氣調零看零點是否穩(wěn)定,如不穩(wěn)則是儀器問題,如空氣穩(wěn)定而放入石英皿后不穩(wěn)定,則檢查是否空白溶液吸光度太高,是否空白溶液藥品過期,或者空白溶液透明范圍不適合此波長測量比如甲醇在210NM以下吸光度很大無法調零。

      10. 儀器狹縫寬度的選擇 醫(yī)學教.育網搜集整理

      狹縫的寬度會直接影響到測定的靈敏度和校準曲線的線性范圍。狹縫寬度過大時,入射光的單色光降低,校準曲線偏離比耳定律,靈敏度降低;狹縫寬度過窄時,光強變弱,勢必要提高儀器的增益,隨之而來的是儀器噪聲增大,于測量不利。選擇狹縫寬度的方法是:測量吸光度隨狹縫寬度的變化。狹縫的寬度在一個范圍內,吸光度是不變的,當狹縫寬度大到某一程度時,吸光度開始減小。因此,在不減小吸光度時的最大狹縫寬度,即是所欲選取的合適的狹縫寬度。

      11. 紫外測量吸光度值不準,什么原因,請指教

      (1).儀器調零后跳動大的話那可能是儀器有問題.

      (2).調零穩(wěn)定的話,看樣品濃度是否過高,最好控制在0-1個吸光度之間.

      (3).濃度合適的話,看是否比色皿沒擦干凈,一般可用蒸餾水沖洗一下,擦干后用鏡頭紙擦干凈.

      (4).檢查樣品是否穩(wěn)定,如果零點不變而放上樣品變化,那么是樣品有變化,檢查樣品是否有問題.

      12.關于儀器維護

     ?。?).儀器工作電源一般為220V,允許10%的電壓波動.

     ?。?).為了延長光源使用壽命,在不使時不要開光源燈.

      (3).單色器是儀器的核心部分,裝在密封盒內不能拆開,為防止色散元件受潮發(fā)霉,必須經常 更換蛋色器盒干燥劑.

      (4).必須正確使用吸收池,保護吸收池光學面.

      (5).光電轉換元件不能長時間暴光,應避免強光照射或受潮積塵.

      二、固體樣品的測定

      固體分為透明的和不透明的,用儀器測都可以測,但形狀有一定要求,根據各個廠家不同,都有其要求,主要是固定問題,均需要配合附件使用。 醫(yī).學教育網搜集整理

      透明固體采用固體樣品池架附件,可方便固定在樣品室內。

      不透明固體又分為兩種,1、面光滑固體,需用鏡面反色附件(利用物體鏡面反色原理);2、表面不光滑固體采用積分球附件可完成儀器對其進行的測量(利用物體慢反色原理)

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