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    醋酸纖維素薄膜電泳法

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    醋酸纖維素薄膜電泳法:

    (1)醋酸纖維素薄膜

    取醋酸纖維素薄膜,裁成2cm×8cm的膜條,將無光澤面向下,浸入巴比妥緩沖液(pH8.6)中,待完全浸透,取出夾于濾紙中,輕輕吸去多余的緩沖液后,將膜條無光澤面向上,置電泳槽架上,經(jīng)濾紙橋浸入巴比妥緩沖液(pH8.6)中。

    (2)點(diǎn)樣與電泳

    于膜條上距負(fù)極端2cm處,條狀滴加蛋白含量約5%的供試品溶液2~3μl,在10~12V/cm電位梯度下電泳。電泳區(qū)帶距離以4~5cm為宜。

    (3)染色

    電泳完畢,將膜條取下浸于氨基黑染色液中,2~3分鐘后,用漂洗液浸洗數(shù)次,直至脫去底色。醫(yī)學(xué)|教育|網(wǎng)搜集整理

    (4)透明

    將洗凈并完全干后的膜條浸于透明液中10~15分鐘,取出平鋪于潔凈的玻板上,干后即成透明薄膜,可于分光光度計(jì)上測定和作標(biāo)本長期保存。

    (5)含量測定

    未經(jīng)透明處理的醋酸纖維素薄膜電泳圖可按各藥品項(xiàng)下規(guī)定的方法測定,一般采用洗脫法或掃描法,測定各蛋白質(zhì)組分的相對含量(1%)。

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    主講老師:劉 楝老師

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