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色譜分離法概述:
①吸附色譜法:常用的吸附劑是硅膠、氧化鋁和反相硅膠,洗脫劑一般采用混合溶劑。例如分離混合甾體皂苷元的方法,先將樣品溶于含2%氯仿的苯中,上柱后用此溶劑洗出單羥基皂苷元,再用含20%氯仿的苯洗出單羥基且具酮基的皂苷元,最后用含10%甲醇的苯洗出雙羥基的皂苷元。
②分配色譜法:由于皂苷極性較大,醫(yī)學|教育|網搜集整理可采用分配色譜法進行分離。一般用低活性的氧化鋁或硅膠作吸附劑,用不同比例的氯仿-甲醇-水或其他極性較大的有機溶劑進行梯度洗脫。
③高效液相色譜法:一般使用反相色譜法,以乙腈-水或甲醇-水為流動相分離和純化皂苷可得到良好的效果。也可將極性較大的皂苷做成衍生物后用正相柱進行分離。