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培養(yǎng)基的制備程序不同類型培養(yǎng)基制備的程序也不盡相同。但一般培養(yǎng)基的程序主要可分為：配料、溶化、矯正pH、澄清過濾、分裝、滅菌及檢定等8個(gè)步驟。

（一）配料

按培養(yǎng)基處方準(zhǔn)確稱取各種成分，先在三角燒瓶中加入少量蒸餾水，再加入各種成分，以防蛋白胨等粘附于瓶底，然后再以剩余的水沖洗瓶壁。

（二）溶化

將各種成分混勻于水中，最好以流通蒸氣溶化半小時(shí)，如在電爐上溶化應(yīng)隨時(shí)攪拌，如有瓊脂成分時(shí)更應(yīng)注意防止外溢。溶化完畢，補(bǔ)足失去的水分。

（三）矯正pH

1.pH測定

取與標(biāo)準(zhǔn)管同口徑的試管（通常用華氏試管）3支，于第1、3管各加入欲測定pH的的培養(yǎng)基5ml，并于第一管中加入0.2g/L的酚紅0.25ml作為測定管，混勻；于第2管加入蒸餾水5ml，第4管為pH標(biāo)準(zhǔn)比色管。

2.pH的校正

若測定管過酸或過堿可用0.1mol/L氫氧化鈉或0.1mol/L鹽酸溶液矯正，直至顏色與標(biāo)準(zhǔn)管相同為止，加堿或加酸時(shí)要精確緩慢，每加1滴后要充分混勻，比色后再加第2滴（有時(shí)僅加半滴）準(zhǔn)確記錄加入的量。