抗體純化鹽析法即飽和硫酸銨沉淀法是檢驗主任醫(yī)師考試涉及到的重要知識點，醫(yī)學教育網(wǎng)為了幫助大家復習，整理了相關內容，具體如下：

該純化方法是基于在待純化免疫血清中加入飽和硫酸銨溶液，由于抗體也是一種蛋白質，其在水溶液中的溶解度是由其本身攜帶的親水基團數(shù)和電荷數(shù)決定的，當我們向抗血清中加入飽和硫酸銨溶液后，硫酸根離子和銨根離子與抗體競爭溶液中的水分子，因為硫酸根離子和銨根離子與抗體分子相比，具有更強的親水性，因此抗體分子表面的水化膜被破壞，同時其暴露出來的帶電基團被溶液中的鹽離子所中和進而導致其溶解度大大降低，依據(jù)此原理從而將其從抗血清中分離。

具體實驗步驟如下：

將5ml抗血清與0.01M PBS在離心管內等體積混合，向其中加入10ml飽和硫酸銨溶液，邊滴加邊搖勻，然后置于2到8攝氏度靜置過夜。

將步驟a中的待分離物于離心機內離心，8000r/min離心15到20分鐘，除上清。

將步驟b中離心后的沉淀用2ml 0.01M PBS 溶解，然后緩慢加入3ml 飽和硫酸銨溶液，邊滴加邊搖勻，然后置于2到8攝氏度靜置2小時。

將步驟c中的待分離物于離心機內離心，8000r/min離心15到20分鐘，除上清。

將步驟d中離心后的沉淀用1.65ml 0.01M PBS 溶解，然后緩慢加入3.35ml 飽和硫酸銨溶液，邊滴加邊搖勻，然后置于2到8攝氏度靜置2小時。

將步驟e中的待分離物于離心機內離心，8000r/min離心15到20分鐘，除上清。

將步驟f中離心后的沉淀用1ml 0.01M PBS 溶解， 轉移到MD 14000透析袋內，用0.01 M PBS進行透析，透析4次以上，每次至少1小時以上。