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    蛋白質的分離與純化

    2018-07-05 15:28 醫(yī)學教育網
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    蛋白質的分離與純化是執(zhí)業(yè)獸醫(yī)資格考試會涉及的內容,為了幫助考生更好的復習,醫(yī)學教育網整理以下內容,請參考:

    1.鹽析與有機溶劑沉淀:在蛋白質溶液中加入大量中性鹽,以破壞蛋白質的膠體性質,使蛋白質從溶液中沉淀析出,稱為鹽析。常用的中性鹽有:硫酸銨、氯化鈉、硫酸鈉等。鹽析時,溶液的pH在蛋白質的等電點處效果最好。凡能與水以任意比例混合的有機溶劑,如乙醇、甲醇、丙酮等,均可引起蛋白質沉淀。

    2.電泳:蛋白質分子在高于或低于其pI的溶液中帶凈的負或正電荷,因此在電場中可以移動。電泳遷移率的大小主要取決于蛋白質分子所帶電荷量以及分子大小。

    3.透析:利用透析袋膜的超濾性質,可將大分子物質與小分子物質分離開。

    4.層析:利用混合物中各組分理化性質的差異,在相互接觸的兩相(固定相與流動相)之間的分布不同而進行分離。主要有離子交換層析,凝膠層析,吸附層析及親和層析等,其中凝膠層析可用于測定蛋白質的分子量。

    5.超速離心:利用物質密度的不同,經超速離心后,分布于不同的液層而分離。超速離心也可用來測定蛋白質的分子量,蛋白質的分子量與其沉降系數(shù)S成正比。

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