黃酮類化合物分子量如何測定?
黃酮類化合物是一大類存在于植物中的次生代謝產物,具有多種生物活性。對于黃酮類化合物分子量的測定,通??梢酝ㄟ^以下幾種方法進行:
1.質譜法(Mass Spectrometry, MS):質譜是測定分子量最直接、最準確的方法之一。通過將樣品離子化后,在磁場或電場中根據其質量與荷質比的不同而被分離,從而可以精確地測得化合物的相對分子質量。對于黃酮類化合物來說,常用的有ESI-MS(電噴霧電離質譜)、MALDI-TOF MS(基質輔助激光解吸電離飛行時間質譜)等。
2.核磁共振光譜法(Nuclear Magnetic Resonance, NMR):雖然NMR主要用于確定分子結構,但通過分析其信號也可以間接推斷出化合物的大致分子量。特別是當結合使用^1H-NMR和^13C-NMR時,可以更準確地解析復雜黃酮類化合物的結構信息。
3.高效液相色譜法(High Performance Liquid Chromatography, HPLC):雖然HPLC主要用于分離純化及定性定量分析,但結合特定檢測器如蒸發(fā)光散射檢測器(ELSD)或質譜聯用(MS),也可以用于輔助測定化合物的分子量。特別是對于那些在紫外光下沒有吸收特性的黃酮類化合物。
4.凝膠滲透色譜法(Gel Permeation Chromatography, GPC):這是一種根據分子大小來分離混合物的技術,適用于聚合物和大分子物質的相對分子質量分布測定。雖然不常用作單個黃酮分子量的直接測量手段,但對于研究黃酮類化合物的聚合狀態(tài)或純度有一定幫助。
5.元素分析法:通過對樣品進行完全燃燒后測定其碳、氫、氮等主要組成元素的比例,并結合化學式的推算來估算分子量。此方法適用于已知結構但需要驗證理論與實際是否一致的情況。
綜上所述,質譜法是目前最常用且最為準確的黃酮類化合物分子量測定方法。在具體應用時,可根據實驗室條件和樣品特性選擇合適的技術手段。