方法名稱： 亞甲藍注射液—亞甲藍的測定—分光光度法

應用范圍： 本方法采用分光光度法測定亞甲藍注射液中亞甲藍的含量。

本方法適用于亞甲藍注射液。

方法原理： 供試品加稀乙醇制成供試液，置紫外可見分光光度計，于661nm波長處測定吸收度，計算出其含量。

試劑： 1.稀乙醇

儀器設(shè)備： 紫外可見分光光度計

試樣制備： 1.稀乙醇

取乙醇529mL，加水稀釋至1000mL。

2.對照品溶液的制備

精密稱取亞甲藍對照品適量，加稀乙醇定量稀釋制成每1mL中約含2µg的溶液，即得對照品溶液。

3.供試品溶液的制備

精密量取供試品適量（約相當于亞甲藍20mg），加稀乙醇定量稀釋制成每1mL中約含2µg的溶液，即得供試品溶液。

注：“精密稱取”系指稱取重量應準確至稱取重量的千分之一。“精密量取”系指量取體積的準確度應符合國家標準中對該體積移液管的精度要求。

操作步驟： 取對照品溶液與供試品溶液照紫外-可見分光光度法，于波長661nm處測定吸收度。將結(jié)果與1.169相乘，即得供試量中含有C16H18ClN3S·3H2O的量。

注：分光光度法應以配制供試品的同批溶劑為對照，采用1cm的石英吸收池。以吸收度最大的波長作為測定波長，一般供試品的吸收度讀數(shù)，以在0.3-0.7之間的誤差較小。儀器的狹縫波帶寬度應小于供試品吸收帶的半寬度，否則測得的吸收度偏低。狹縫寬度的選擇，應以減少狹縫寬度時供試品的吸收度不再增加為準。由于吸收池和溶劑本身可能有空白吸收，因此測定供試品的吸收度后應減去空白讀數(shù)，再計算含量。

參考文獻： 中華人民共和國藥典，國家藥典委員會編，化學工業(yè)出版社，2005年版，一部，p.189。