方法名稱：復(fù)方丹參滴丸—丹參素和原兒茶醛的測定—高效液相色譜法

應(yīng)用范圍：該方法采用高效液相色譜法測定復(fù)方丹參滴丸中丹參素和原兒茶醛的含量。

該方法適用于中藥制劑復(fù)方丹參滴丸。

方法原理：供試品加1%醋酸溶液進行超聲，放冷，濾過，取續(xù)濾液進入高效液相色譜儀進行色譜分離，用紫外吸收檢測器，于波長279nm處檢測丹參素和原兒茶醛的吸收值，計算出其含量。

試劑：1. 甲醇（色譜純）

2. 醋酸

3. 對羥基苯甲酸

儀器設(shè)備：1. 儀器

1.1 高效液相色譜儀

1.2 色譜柱

Nucleosil C18色譜柱（250×4.6mm，10μm）。

1.3 紫外吸收檢測器

2. 色譜條件

2.1 流動相：甲醇 水 冰醋酸 = 19 80 1

2.2 檢測波長：279nm

2.3 柱溫：室溫

試樣制備：1. 稱取供試品

精密稱取該品樣品0.125g。

2. 內(nèi)標溶液的制備

精密稱取對羥基苯甲酸10.0mg置于100mL量瓶中，加1%醋酸溶液稀釋至刻度，作為內(nèi)標溶液。

3. 對照品溶液的制備

精密稱取丹參素對照品20.0mg和原兒茶醛對照品4.0mg，置于200mL量瓶中，加1%醋酸溶液稀釋至刻度，作為對照品儲備液。

4. 標準溶液的制備

精密量取上述對照品儲備液1.0，2.0，3.0，4.0，6.0，8.0mL置于10mL量瓶中，各精密加入內(nèi)標溶液1.0mL，用1%醋酸溶液稀釋至刻度，作為繪制標準曲線的系列濃度標準溶液。

5.供試品溶液的制備

將供試品置于25mL量瓶中，加入內(nèi)標溶液2.5mL，加入1%醋酸溶液超聲處理使其溶解后，放至室溫并用1%醋酸溶液稀釋至刻度，樣品溶液用0.45μm濾膜過濾，棄去初濾液，取續(xù)濾液作為供試品溶液。

注：“精密稱取”系指稱取重量應(yīng)準確至所取重量的千分之一。“精密量取”系指量取體積的準確度應(yīng)符合國家標準中對該體積移液管的精度要求。

操作步驟：1. 標準曲線繪制

精密吸取標準溶液10μL注入高效液相色譜儀，用紫外吸收檢測器，于波長279nm處測定丹參素和原兒茶醛的吸收值，以標準溶液濃度對供試品與內(nèi)標峰的峰面積比值繪制標準曲線，進行線性回歸，得到回歸方程。

2. 供試品的測定

精密吸取供試品溶液10μL注入高效液相色譜儀，用紫外吸收檢測器，于波長279nm處測定丹參素和原兒茶醛的吸收值，計算出其含量。