人體內(nèi)情況

堿性磷酸酶主要用于阻塞性黃疸、原發(fā)性肝癌、繼發(fā)性肝癌、膽汁淤積性肝炎等的檢查?；歼@些疾病時(shí)，肝細(xì)胞過(guò)度制造ALP，經(jīng)淋巴道和肝竇進(jìn)入血液，同時(shí)由于肝內(nèi)膽道膽汁排泄障礙，反流入血而引起血清堿性磷酸酶明顯升高。但由于骨組織中此酶亦很活躍。因此，孕婦、骨折愈合期、骨軟化癥。佝僂病、骨細(xì)胞癌、骨質(zhì)疏松、肝膿腫、肝結(jié)核、肝硬變、白血病、甲狀腺機(jī)能亢進(jìn)時(shí)，血清堿性磷酸酶亦可升高，應(yīng)加以鑒別。

研究應(yīng)用

堿性磷酸酶也是目前免疫診斷試劑產(chǎn)品最常用的標(biāo)記酶之一。與辣根過(guò)氧化物酶（HRP)相比，ALP用作標(biāo)記酶的優(yōu)點(diǎn)是，穩(wěn)定性高、靈敏度高，缺點(diǎn)是成本高，標(biāo)記困難。

在研究中最常用的ALP如下：

◇細(xì)菌堿性磷酸酶Bacterial alkaline phosphatase (BAP), 來(lái)源：Escherichia coliC4 ；

◇ Shrimp alkaline phosphatase (SAP), 來(lái)源：一種北極蝦 (Pandalus borealis) ;

◇ 小牛腸堿性磷酸酶Calf Intestinal Alkaline Phosphatase (CIP);

◇ 胎盤(pán)堿性磷酸酶Placentalalkaline phosphatase (PALP)和分泌性堿性磷酸酶the secreted alkaline phosphatase (SEAP)，后者是前者的C末端短缺版——與PALP相比，SEAP沒(méi)有PALP的C末端最后24個(gè)氨基酸(這24個(gè)氨基酸構(gòu)成了與糖基化磷脂酰肌醇靶向錨定的區(qū)域)

ALP主要應(yīng)用于分子生物學(xué)和酶免分析中：

★分子生物學(xué)中主要用作核酸的去磷酸化。因?yàn)镈NA通常會(huì)在5'端結(jié)合磷酸基團(tuán)，用ALP去磷酸化能防止DNA分子5'端與3'端連接，從而在后續(xù)步驟準(zhǔn)備好之前讓DNA分子抑制處于線性化狀態(tài);同樣，通過(guò)去磷酸化可用作放射標(biāo)記示蹤。通常用作這些目的用的最多的是Shrimp alkaline phosphatase (SAP)，因?yàn)樵诜磻?yīng)完成之后它是最容易滅活的。

★酶免分析中應(yīng)用最多的是ELISA，以競(jìng)爭(zhēng)法測(cè)小分子抗原為例，抗體先與固相載體結(jié)合，然后讓待測(cè)樣品與事先經(jīng)ALP標(biāo)記過(guò)的該抗原競(jìng)爭(zhēng)地與抗體結(jié)合，洗去未反應(yīng)的過(guò)量ALP-抗原，加入顯色底物。則可以通過(guò)與按梯度濃度變化的標(biāo)準(zhǔn)品繪出的標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)比從而知道待測(cè)樣品中抗原的濃度。ELISA中用的比較多的是 辣根過(guò)氧化物酶(HRP)，底物為OPD， 深桔黃色 ，檢測(cè)波長(zhǎng)492nm；TMB， 藍(lán)綠色，檢測(cè)波長(zhǎng)450nm 堿性磷酸酶，底物為PNPP（對(duì)－消基苯磷酸酯）， 黃色 ，檢測(cè)波長(zhǎng)405nm

★目前工業(yè)上一個(gè)普遍的應(yīng)用是作為檢驗(yàn)牛奶的巴斯的滅菌的標(biāo)志：被巴斯德過(guò)高溫滅菌的分子會(huì)被滅活，向其中和未巴斯滅菌的牛奶中加入ALP的底物，2分鐘后未滅菌的樣品應(yīng)該顯黃色，如果待測(cè)樣品(指被巴斯滅菌過(guò)的牛奶)也能呈現(xiàn)相同顏色，則說(shuō)明巴斯滅菌溫度未過(guò)度。當(dāng)然總有例外，因?yàn)橛猩贁?shù)細(xì)菌會(huì)產(chǎn)生耐熱的ALP。