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    淀粉酶的檢測

    2009-10-29 16:15 來源:
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      胰淀粉酶由胰腺以活性狀態(tài)排入消化道,是最重要的水解碳水化合物的酶,和唾液腺分泌的淀粉酶一樣都屬于α-淀粉酶,作用于α-1,4糖苷鍵,對分支上的α-1,6糖苷鍵無作用,故又稱淀粉內(nèi)切酶,其作用的最適pH為6.9,可通過腎小球濾過,是唯一能在正常時于尿中出現(xiàn)的血漿酶。

      人體的其他組織如卵巢、輸卵管、肺、睪丸、精液、乳腺等的提取物中都發(fā)現(xiàn)有淀粉酶活性;血液、尿液、乳液中也含淀粉酶。血液淀粉酶中主要來自胰腺、唾液腺,尿液中淀粉酶則來自于血液。

      測定血清淀粉酶同工酶時,發(fā)現(xiàn)有兩個主要的同工酶區(qū)帶及數(shù)個次要區(qū)帶。兩個主要區(qū)帶中的一個和胰腺的提純物或分泌物電泳的位置相同,因此命名為P-同工酶;另一個和唾液腺提純物或唾液電泳在同一位置,因此命名為S-同工酶。測定淀粉酶同工酶有助于對胰腺疾病的鑒別診斷。

      參考值:限定性底物法:

      血清淀粉酶 220U/L(37℃)

      尿淀粉酶 1200U/L(37℃)

      P同工酶 血清115U/L

      尿800U/L

      新生兒血清淀粉酶約為成年人的18%,主要為S-型,到5歲時達成人水平;在一歲內(nèi)測不出血清P-型淀粉酶,以后緩慢上升,在10~15歲時達成人水平。

      血清淀粉酶和尿淀粉酶測定是胰腺疾病最常用的實驗醫(yī)|學(xué)教育網(wǎng)搜集整理室診斷方法,當(dāng)罹患胰腺疾病,或有胰腺外分泌功能障礙時都可引起其活性升高或降低,有助于胰腺疾病的診斷。尿淀粉酶水平波動較大,所以用血清淀粉酶檢測為好,或兩者同時測定。淀粉酶活性變化亦可見于某些非胰腺疾患,因此在必要時測定淀粉酶同工酶具有其鑒別診斷意義。

      1.血清淀粉酶升高:最多見于急性胰腺炎,是急性胰腺炎的重要診斷指標之一,在發(fā)病后2~12h活性開始升高,12~72h達峰值,3~4天后恢復(fù)正常。淀粉酶活性升高的程度雖然并不一定和胰腺損傷程度相關(guān),但其升高的程度越大,患急性胰腺炎的可能性也越大,因此雖然目前還都用淀粉酶作為急性胰腺炎診斷的首選指標,但其特異性和靈敏度都還不夠高。當(dāng)懷疑急性胰腺炎時,應(yīng)對患者血清和尿淀粉酶活性連續(xù)作動態(tài)觀察,還可結(jié)合臨床情況及其他試驗,如胰脂肪酶、胰蛋白酶等測定共同分析,作出診斷。

      淀粉酶測定對監(jiān)測急性胰腺炎的并發(fā)癥如胰腺假性囊腫,胰腺膿腫亦有價值,此種時候血淀粉酶活性多持續(xù)升高。重癥急性胰腺炎時可以引起胸腔積液或/和腹腔積液,積液中的淀粉酶活性甚至可高于血清淀粉酶活性100倍以上。

      急性胰腺炎的診斷有一定的困難,因為其他急腹癥也可以引起淀粉酶活性升高。所以當(dāng)懷疑急胰腺炎時,除應(yīng)連續(xù)監(jiān)測淀粉酶外,還應(yīng)結(jié)合臨床情況及其他試驗,如胰脂肪酶、胰蛋白酶等測定結(jié)果共同分析,作出診斷。

      慢性胰腺炎淀粉酶活性可輕度升高或降低,但沒有很大的診斷意義。胰腺癌早期淀粉酶活性可見升高。

      淀粉酶活性中度或輕度升高還可見于一些醫(yī)|學(xué)教育網(wǎng)搜集整理非胰腺疾病,如腮腺炎、急性腹部疾?。ㄏ詽兇┛?、上腹部手術(shù)后、機械性腸梗阻、腸系膜血管病變、膽道梗阻及急性膽囊炎等)、服用鎮(zhèn)痛劑、酒精中毒、腎功能不良及巨淀粉酶血癥等情況,應(yīng)加以注意。

      血液中淀粉酶能被腎小球濾過,所以任何原因引起的血清淀粉酶升高時,都會使尿中淀粉酶排出量增加,尤以急性胰腺炎時為多見,急性胰腺炎時腎清除淀粉酶的能力加強,其升高可早于血淀粉酶,而下降晚于血淀粉酶。

      2.淀粉酶同工酶:血清淀粉酶除來源于胰腺外,還來源于唾液腺及許多其他組織,所以在淀粉酶活性升高時,同工酶的測定有助于疾病的鑒別診斷。P-同工酶升高或降低時,說明可能有胰腺疾患;S-同工酶的變化可能是源于唾液腺或其他組織。當(dāng)血清淀粉酶活性升高而又診斷不清時,應(yīng)進一步測定同工酶以助鑒別診斷。有許多方法可以測定同工酶,瓊酯糖和醋纖膜電泳法都是比較常用的方法。

      淀粉酶的測定結(jié)果受方法的影響較大,不同方法參考值亦有所不同,臨床所用方法也較多,因此必須了解所用測定方法和其參考值,才能作出正確的診斷。

      作為胰腺疾病尤其是急性胰腺炎診斷的試驗,淀粉酶測定應(yīng)用已久,試驗方法曾屢經(jīng)改進,已經(jīng)有過200多種方法。其試驗基本原理都是把病人的標本(含淀粉酶)和作為底物的多糖一起進行反應(yīng)后,測定反應(yīng)后的剩余底物或產(chǎn)物來計算淀粉酶的醫(yī)|學(xué)教育網(wǎng)搜集整理活性。很久以來一直以淀粉為底物,但由于淀粉來源物質(zhì)不同,其分子結(jié)構(gòu)、分子量變化都很大,因而會影響到淀粉酶的測定。多年的研究結(jié)果,認為從天然物質(zhì)中提取的淀粉分子結(jié)構(gòu)差異很大,不宜用做底物。現(xiàn)在已經(jīng)改用限定性底物法,即選用結(jié)構(gòu)明確,性質(zhì)穩(wěn)定的小分子低聚糖作為底物,能產(chǎn)生穩(wěn)定的限定性產(chǎn)物,然后測定反應(yīng)產(chǎn)物(發(fā)色團或葡萄糖)量來計算淀粉酶活性。

      用做限定性底物的一般有4~7個葡萄糖(戊糖、庚糖等),并連有發(fā)色團如β2-氯-4-硝基酚-G7、ethylidene-G7PNP等。試驗中所用的工具酶α-葡糖苷酶來源不同時,其水解淀粉酶作用后產(chǎn)物的程度也不同,也會影響的測定結(jié)果。

      很多陰離子有激活淀粉酶的作用,其中以Cl-,Br-為最強。血清甘油三酯濃度高時,可以抑制淀粉酶活性,應(yīng)將標本加以稀釋,以降低其影響。由于Ca2+是淀粉酶分子組成的部分,所以除肝素外,一般抗凝劑如草酸鹽,枸櫞酸鹽等因能與Ca2+結(jié)合,抑制淀粉酶活性而不宜應(yīng)用。

      另外應(yīng)該注意淀粉酶的測定方法操作要簡單,快速,適于急診應(yīng)用,因為急性胰腺炎需要盡快診斷和治療。

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