雙抗體夾心法是檢測抗原最常用的方法,操作步驟如下:
(1)將特異性抗體與固相載體連接,形成固相抗體:洗滌除去未結(jié)合的抗體及雜質(zhì)。
(2)加受檢標本:使之與固相抗體接觸反應一段時問,讓標本中的抗原與固相載體上的抗體結(jié)合,形成固相抗原復合物。洗滌除去其他未結(jié)合的物質(zhì)。
(3)加酶標抗體:使固相免疫復合物上的抗原與酶標抗體結(jié)合。徹底洗滌未結(jié)合的酶標抗體。此時固相載體上帶有的酶量與標本中受檢物質(zhì)的量成正相關(guān)。
?。?)加底物:夾心式復合物中的酶催化底物成為有色產(chǎn)物。根據(jù)顏色反應的程度進行該抗原的定性或定量。
根據(jù)同樣原理,將大分子抗原分別制備固醫(yī)學教丨育網(wǎng)整理相抗原和酶標抗原結(jié)合物,即可用雙抗原夾心法測定標本中的抗體。
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