將待存菌分純后，用準備好的保護劑牛奶洗下菌苔，把菌懸液滴入菌種管后，在管口抽取少許棉花塞入管內(nèi)細頸處，放入冰箱－40℃速凍40min，放入醫(yī)學教.育網(wǎng)搜集整理準備好的混有鹽的冰中，接上真空泵，真空抽干呈粉末狀，火焰封口，貼上標簽，保存于－40℃冰箱。此法保存時間長，可達15年，不易變性，但需要專用儀器，一般實驗室難以配備，而且過程復雜，操作難度大，需要較長時間才能完成。所以此方法適合具有條件的實驗室菌種的長期保存。