照高效液相色譜法(中國(guó)藥典1995年版一部附錄Ⅵ D)測(cè)定。 色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn) 用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑;冰醋酸溶液(1→90)-乙腈(61:39)為流動(dòng)相,檢測(cè)波長(zhǎng)為260nm,理論板數(shù)按龍血素B峰計(jì)算應(yīng)不低于5000,龍血素B峰和內(nèi)標(biāo)峰的分離度應(yīng)不少于4.0。 內(nèi)標(biāo)溶液的制備 精密稱取炔諾酮適量,加乙腈使溶解并制成每1ml含50μg的溶液,即得。 測(cè)定法 精密稱取龍血素B對(duì)照品適量,加氯仿使溶解并制成每1ml含20μg的溶液,精密量取該溶液3ml,水浴蒸干,殘?jiān)尤刖芰咳〉膬?nèi)標(biāo)溶液2ml,使溶解,取10μl注入液相色譜儀,記錄色譜圖;另取本品粉末(通過(guò)三號(hào)篩)約1g,精密稱定,加硅藻土2g,混勻,置索氏提取器中,加氯仿100ml,置水浴中加熱回流6小時(shí),提取液減壓濃縮至近干,加醋酸乙酯適量使溶解。移置10ml量瓶中,用醋酸乙酯洗滌容器并稀釋至刻度,搖勻,濾過(guò),棄去初濾液,收集續(xù)濾液作為供試品溶液。照薄層色譜法(中國(guó)藥典1995年版一部附錄Ⅵ B)試驗(yàn),精密量取供試品溶液200μl,點(diǎn)于含羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠HF254薄層板上,使成條狀,在供試品條斑側(cè)1.5cm處點(diǎn)龍血素B對(duì)照品溶液10μl,作為對(duì)照。用石油醚(60~90℃)-氯仿-醋酸乙酯-甲醇(15:8:2:1)為展開(kāi)劑,展開(kāi)。取出,晾干,置紫外光燈(254nm)下檢視,刮取與龍血素B對(duì)照品相應(yīng)位置上的條斑。置3號(hào)垂熔玻璃漏斗中,用乙醇25ml洗脫,收集洗脫液,減壓蒸干。殘?jiān)尤刖芰咳〉膬?nèi)標(biāo)溶液2ml使溶解,取10μl注入液相色譜儀,按內(nèi)標(biāo)法以峰面積計(jì)算,即得。 本品含龍血素B(C18H20O5)不得少于0.40%醫(yī)|學(xué)教育網(wǎng)搜集整理。
注:聚酰胺的處理:取聚酰胺粉以90%~95%乙醇浸泡,不斷攪拌,除去氣泡后裝入層析柱中。用3~4倍體積的90%~95%乙醇洗滌,洗至洗液透明并且蒸干后無(wú)殘?jiān)?或極少殘?jiān)?。再依次用2~2.5倍體積的5%NaOH水溶液,1倍體積的蒸餾水,2~2.5倍體積的10%醋酸水溶液洗滌,最后用蒸餾水洗滌呈中性為止,取出烘干備用,即得。